产品概述
Ubri-Amrita™ iPSC 重编程 RNA-LNP 试剂盒 (Version 2.0) 采用专利 RNA-LNP（脂质纳米颗粒）递送技术，将重编程因子以 mRNA / circRNA 形式递送至体细胞内瞬时表达，实现非整合、非病毒、低毒性的高效重编程。支持 PBMC 直接重编程（效率 0.3%–0.5%，每 10 万 PBMC 得 300–500 个 iPSC 克隆）与成纤维细胞重编程（效率 5%–10%）。2.0 版本搭载 circRNA 表达体系，重编程因子表达更持久稳定，效率较 1.0 提升 50–100 倍；即开即用，无需病毒操作与清除验证，建系鉴定最早可于 P3–P4 开展，适配 iPSC 建系、疾病模型与细胞治疗研究。
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产品特点
- 即开即用：直接用于 PBMC 重编程，预培养周期短（1–6 天），无需复杂预处理
- 高效重编程：每 10 万 PBMC → 300–500 个 iPSC 克隆（效率 0.3%–0.5%）；成纤维细胞效率 5%–10%
- 专利 RNA-LNP 技术：零基因组整合风险、无病毒残留，无需传代清除与病毒清除验证
- 2.0 版 circRNA 体系：重编程因子表达更持久稳定，效率较 1.0 提升 50–100 倍
- 建系周期短：跳过病毒清除传代，克隆鉴定最早 P3–P4 开展，节省培养基与耗材（文献数据：较仙台病毒法节省 63.6%）
- 疾病表型保留：文献验证可忠实保留供体致病突变与功能性电生理表型，适配疾病建模
- 配方纯净低毒：无有害化学添加剂，受体介导内吞保护原代细胞活性
技术规格
| 品牌/厂商 | uBriGene |
| 技术原理 | RNA-LNP 脂质纳米颗粒递送（mRNA / circRNA） |
| 重编程效率 | PBMC 0.3%–0.5%（300–500 克隆/10万细胞）；成纤维细胞 5%–10% |
| 适用起始细胞 | 人 PBMC、成纤维细胞、造血干细胞（HSC）等，尤其难重编程细胞 |
| 版本 | Version 2.0（circRNA 体系，效率较 1.0 提升 50–100x） |
| 规格 | 2 Test / 6 Test（6 Test 足够 6 次起始 1–2×10⁵ PBMC） |
| 组分 | Ubri-iPSC RPM Cocktail（3 管，80 μL/管）+ Serum-free Enhancer B (500X) |
| 储存条件 | -80°C 长期（1 年）；解冻后 4°C 1–2 周，可分装复冻一次 |
| 运输方式 | 干冰运输 |
方法学对比：RNA-LNP vs 仙台病毒 vs 病毒载体
目前主流非整合重编程路线有三种，核心差异在于递送载体、残留风险与下游清除成本。RNA-LNP 仅递送功能性 RNA，属天然代谢、无基因组整合、无病毒残留，是兼顾效率与安全性的新一代方案：
| 维度 | RNA-LNP（本试剂盒） | 仙台病毒 | 逆转录 / 慢病毒载体 |
|---|---|---|---|
| 基因组整合风险 | 无（RNA 瞬时表达） | 无（但为复制型 RNA 病毒） | 有（插入突变风险） |
| 病毒残留 / 清除 | 无残留，无需清除验证 | 需传代至 P10+ 逐步稀释清除 | 需整合位点分析与载体验证 |
| 建系周期 | 克隆鉴定最早可于 P3–P4 开展 | 通常需 P10–P20 | 依赖整合克隆筛选 |
| 监管与申报成本 | 低（无病毒操作与清除验证） | 高（需病毒清除验证与特殊生产控制） | 高 |
| 操作门槛 | 即开即用，常规细胞间可操作 | 需生物安全相应管理 | 需病毒包装或外购病毒 |
对比要点参考：Emory 大学医学院团队发表于《International Journal of Molecular Sciences》的 RNA-LNP 与仙台病毒头对头研究（2026），该研究使用 uBriGene Ubri-iPSC® RNA-LNP 试剂盒，数据显示 RNA-LNP 路线每个 iPSC 克隆所需培养基与耗材量减少约 63.6%，且两类方法来源的 iPSC 在多能性标志物（SSEA4 / SOX2 / OCT4 / TRA-1-81）、三胚层分化与核型上无显著差异。
重编程流程与时间线（Protocol 概览）
试剂盒即开即用，PBMC 与成纤维细胞两条路线的关键节点如下（以 6 孔 / 12 孔板体系为例，详细操作以随货说明书为准）：
| 阶段 | PBMC 路线 | 成纤维细胞路线 |
|---|---|---|
| 准备期 | PBMC 用完全培养基稀释至 2×10⁶ cells/mL 接种，隔天补液（1–6 天） | 细胞解冻扩增至对数生长期（Day -6 ~ 0） |
| Day 0 | 按 1×10⁵–2×10⁵ 活细胞/孔接种未处理孔板，加入 RNA-LNP 试剂 | 胰酶消化，1000–2000 细胞/孔接种 LN521 包被 6 孔板，换重编程培养基并加 RNA-LNP 试剂 |
| Day 2–7 | Day 2 转移至 LN521 包被孔板并补加重编程培养基与试剂；Day 4/6 重复换液补加 | Day 1/3/5/7 按方案换液并补加 RNA-LNP 试剂 |
| Day 8–16 | 隔天换重编程培养基，监测克隆出现 | 每日换重编程培养基，监测克隆 |
| Day 13–20 | 克隆足够大时挑取单克隆（通常 Day 13–16 可见明确 iPSC 克隆） | Day 14 可见克隆，Day 16–20 挑克隆 |
挑克隆后：接种于 LN521（或等效基底）包被板，用多能干细胞培养基（如 Doracell YS20R）常规换液扩增；P3–P4 即可开展核型与多能性鉴定，无需病毒清除传代。
重编程效率参考数据
- PBMC 起始：每 1×10⁵ 个起始 PBMC 可获得 300–500 个 iPSC 克隆，效率 0.3%–0.5%；不同年龄供体（10–60 岁）均可成功重编程。
- 成纤维细胞起始：每 1,000 个起始细胞可获得 50–100 个克隆，效率 5%–10%。
- 多能性验证：克隆高表达 SSEA4、OCT4、SOX2、TRA-1-60 / TRA-1-81 等标志物，具三胚层分化能力，核型正常。
- 2.0 版本升级：搭载 circRNA 表达体系，重编程因子表达更持久稳定，效率较 1.0 版本提升 50–100 倍。
- 疾病表型保留：文献验证 RNA-LNP 来源 iPSC 可忠实保留供体致病突变（如 LQTS 相关 KCNH2 c.2398+5G>T）并再现功能性电生理表型，适配疾病建模。
配套产品与服务推荐
- Doracell YS20R 多能干细胞培养基：挑克隆后扩增 / 日常维持，GMP 级，支持 Weekend-Free 免周末换液方案。
- IMDM 培养基：PBMC 预培养与细胞悬液制备常用基础培养基。
- iPSC 重编程外包服务：不欲自行操作可将 PBMC / 成纤维细胞样本直接寄送，由佰洛平台完成重编程、挑克隆、扩增建系与多能性鉴定全流程交付。
- 包被基底：推荐 LN521 或等效层粘连蛋白包被板（重编程与 iPSC 扩增阶段均适用）。
应用领域
人源 iPSC 建系与疾病模型构建（PBMC / 成纤维细胞起始）；药物筛选与毒理学评价；再生医学与细胞治疗研究；发育生物学与基因功能研究
常见问题
试剂盒如何运输与保存？效期多久？
干冰运输，-80°C 长期保存可达 1 年；首次使用建议分装保存于 -80°C，避免反复冻融。解冻后 4°C 可保存 1–2 周；2 周内用不完可自行分装复冻一次。
重编程必须用 LN521 包被板吗？可以用 Matrigel 吗？
推荐 LN521（或等效层粘连蛋白基底），成孔率与克隆形态更稳定；Matrigel 亦可使用，但批次差异较大，建议固定同一批次并做好预实验验证。
与仙台病毒法相比，RNA-LNP 的核心优势是什么？
三点：① 无病毒残留，无需传代清除，建系鉴定最早可于 P3–P4 开展，大幅节省早期传代的培养基与人力；② 无基因组整合与复制型病毒风险，监管申报路径更简洁；③ 即开即用，常规细胞间即可操作，效率与仙台病毒相当（PBMC 0.3%–0.5%）。
2 Test 与 6 Test 规格如何选择？
6 Test（货号 iPSC-RPM-RNA-LNP-V2）含 3 管 Cocktail + SF Enhancer B，足够 6 次起始 1–2×10⁵ PBMC 的重编程实验；2 Test（V2M）适合初次尝试与小规模验证。
试剂盒可以用于临床治疗吗？
不可以。本产品仅供科学研究使用，不用于人体或临床诊断、治疗。临床级应用请通过我们的技术服务通道或联系 uBriGene GMP 体系沟通。